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大小鼠转棒疲劳仪,手把手教你学会转棒实验方法步骤

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转棒实验

转棒实验 (rotarod test,RT) 是常用的运动行为学实验方法,转棒实验可以用于测定啮齿类动物的运动功能缺陷。啮齿类动物保持平衡并能够和转棒保持同步的能力 被用作运动功能评价的指标。转棒实验对运动协调能力非常敏感,动物必须在旋转的杆上奔跑,以免跌倒。运动协调受损的动物很快就会跌倒。

实验装置

转棒实验设备主要包括转棒仪、旋转杆跑步机、转棒疲劳测试仪或疲劳转棒仪(图 6-10)。国内市场上转棒仪的转棒直径:小鼠一般为3cm, 大鼠为7~9cm, 转棒长度:小鼠转 棒长度为6cm, 大鼠为9cm。转速为0~100r/min可调,速度调整步长一般为0.5~lr/min, 在限 定的时间内(一般为90~100s) 不断增加旋转速度,直到动物不能保持原来的位置。新型设备一般有电脑软件跟踪记录系统,能实现USB串行通信,可以对实验现象进行自动跟踪记录、生成Excel表格导出,实验装置如图6-10所示。

ZH-600B转棒疲劳仪

转棒试验装置改进完成的,有较好的实验性,是抗疲劳药物筛选和鉴定检测的理想仪器。该仪器可做疲劳实验,骨骼肌松驰实验、中枢神经抑制实验,以及其它需用运动方式检测药物作用的实验,如毒性对运动能力的影响,体内某种物质缺乏对运动能力的影响,心脑血管药物对运动能力的影响等等。可多方向的开发利用该仪器基本原理和基本功能。

  • 操作方式:4英寸触摸屏操作

  • 分析数据:在棒时间、跌落时的速度

  • 通讯接口:com或usb接口

  • 通道数:大鼠3通道

  • 适用动物:大鼠

  • 转棒直径:90mm

  • 转棒长度:370mm

  • 圆盘间距:115mm

  • 转速范围:5~50转/分可调

  • 调整度:1转/分

  • 最大提速时间:50转/分约90s

  • 设定时间范围:1~99分钟

  • 工作方式:正转与反转

  • 使用环境温度:5℃ - 40℃

  • 跌落光电自动记录

  • 输入电压:交流220V 50HZ

  • 输入功率:20W

  • 体积:550×550×750mm

  • 重量:13KG

  • 数据导入Excel

正华生物,ZH-600B转棒疲劳仪,Ο561联6Ο62系3Ο7我

操作步骤

(1)提前设置转棒的转速、速度调整步长,转速应调至和动物运动功能相适应的速度。

(2)动物训练 训练分别在静止的转棒和转速为 0.5~1r/min的转棒上进行,根据实验具体的目的确定 训练时间, 一种是训练至所有的动物跌落,潜伏期基 本相似为准;另一个是统一训练固定天数,不管潜伏期如何变化。

(3)正式实验 采用两种方式进行正式实验, 一种是固定转速,即让动物在转棒上适应约5min或 者更短甚至不适应,启动设备使转棒以固定的转速 10~16r/min旋转,观察直至动物不能维持自身平衡 或自身位置跌落的时间,每天2~4次,每次2min, 两次间隔时间10~20min, 取平均值作为最后观察结 果;第二种是转棒逐渐加速,转速0~40r/min一般在 60~100s完成,时间最长可为5min。同样记录动物跌落时间。

评价指标

从实验开始到动物跌落时间即为潜伏期,潜伏期长代表动物的平衡及协调功能好。动物在转棒仪上的重复训练表现可以衡量其运动学习能力。

注意事项

(1)应用转棒观察药物疗效、动物损伤情况等, 一般应在药后或者术后24h进行。

(2)对于成年小鼠在60~100s内将转速从0增加至40r/min,他们的表现很好,但对于老年动物或者幼年动物则很困难。

(3)转棒实验将多只动物放进不同的测试通道,然后启动设备并开始计时,当动物不能保持平衡跌落到地板上,通过红外光束的检测中断停止计时。

(4)随着转速的增加,鼠需要走得更快以保持其原来的位置,从开始实验到鼠跌落的时 间即为潜伏期, 一般来说每只动物测定2~3个潜伏期,取平均值作为运动功能的最后衡量标准。

(5)啮齿类动物的转棒实验表现不是很稳定,因此建议在正式实验之前动物至少要进 行2~3次的预训练。训练过程还可以对动物进行筛选,对于活动过多或者活动过少的动物 通过训练剔除,有研究通过这样的方法将15%的动物筛选剔除,这样可保障后期实验的均一性。

讨论和小结

转棒实验一般采用小鼠和大鼠进行实验,不同种的动物跌落潜伏期可能存在差异,但经过 训练表现可能达到相似的水平。但对于小脑缺陷的小鼠,如小鼠失去了橄榄体,或小脑丢失 了颗粒状神经元、普肯耶细胞,会出现走路摇晃蹒跚的状态,这会导致跌落潜伏期明显缩短 (0~100s) 。 转棒实验的设备一般有3种驱动模式:①恒速模式,角速度 (round per minute,RPM) 是预设的,转速为4~50r/min。可以通过传动带或数字面板输入的方式设定速度,使其 适应实验动物的运动能力;②加速模式,操作人员预设开始和结束转速,以及从第一转速到第 二转速的时间和步长,如从4r/min到40r/min需要4min, 从6r/min到30r/min需要5min等,设备会 根据在设定按节奏自动加速;③加速/反转模式,旋转杆在预定的时间内加速到预定的速度, 然后在同一时间内减速到零,然后反向加速到相反的方向,这是一种对运动不协调同样敏感的测试,但跌落速度要快得多,任何损伤都可能使动物很快就会掉下来,因此可以检测在其他模式中检测不到的损伤。上述3种模式对动物的协调能力要求逐步提高,我们在实验设计时可以根据实验目的及动物协调水平的变化确定选用哪种模式。

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